| セッション情報 |
ポスターセッション(消化器病学会)
大腸（基礎）3
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| タイトル |
消P-484：大腸上皮および単球細胞におけるamphiregulin-regulating protein (ARP) 36によるTNFα放出制御機構
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| 演者 |
塚本 宏延（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学） |
| 共同演者 |
谷田 諭史（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 尾関 啓司（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 海老 正秀（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 溝下 勤（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 森 義徳（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 片岡 洋望（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 神谷 武（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 城 卓志（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学） |
| 抄録 |
【目的】炎症性腸疾患（IBD）における抗TNFα抗体の有効性は確立されているが、不応例や2次無効例が問題である。膜結合型TNFα（2型膜タンパク）は、ADAM17により可溶型TNFαに切断・遊離（shedding）される。ADAM17は、1型膜タンパクであるAmphiregulin（AREG）、HB-EGFも sheddingする。ADAM17やAREGと相互作用するタンパクを同定することで、TNFαsheddingのメカニズムを明らかにし、新規治療ターゲットを探索した。【方法】大腸上皮細胞株（HCT116）および単球細胞株（U937）を使用した。ADAM17によるsheddingに関連するタンパクを同定するため、抗AREG抗体で共免疫沈降後、MALDI/TOFMSにて網羅的に同定した。TNFαshedding測定系を確立するため、IL-1β、フォルボールエステル(TPA）で刺激し、培養液中のTNFα濃度をELISA測定した。ADAM17抑制のため、ADAM阻害剤（KB-R7785）を使用、siRNAによりADAM17蛋白を欠失させた。さらに、MALDI/TOFMSにて同定した蛋白をsiRNAで欠失させ、TNFαsheddingをELISA法で解析した。【結果】MALDI/TOFMS解析にて、10種類のタンパクが同定された。大腸上皮および単球細胞で多く発現がみられるAREG-regulating protein (ARP) 36に着目した。HCT116をIL-1β刺激すると、培養液中のTNFα濃度が経時的に増加した。U937をTPA刺激するとTNFα濃度が増加した。KB-R7785、siRNAによりADAM17を欠失すると、TNFα濃度上昇が、有意に抑制された。さらに、siRNAによりARP36を欠失しても、TNFαの濃度上昇を、有意に抑制した。ARP36欠失は，AREG、HB-EGFのsheddingを抑制しなかった。【考察】ARP36欠失は，TNFαsheddingを抑制したが、AREG、HB-EGFのsheddingを抑制しなかったことから、ARP36は，ADAM17による１型および2型膜タンパクの切断を制御する重要な分子と考えられた。【結論】ARP36の抑制は、TNFαsheddingのみを制御し、新規IBD治療戦略になりうると考えられた。 |
| 索引用語 |
TNFα, ADAM17 |
