| セッション情報 | ポスターセッション(消化器病学会)胃-基礎３ |
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| タイトル | 消P-58：TGFβによるROSおよびADAM17を介したEGF受容体transactivationのメカニズムの解析 |
| 演者 | 海老 正秀（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学） |
| 共同演者 | 片岡 洋望（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 志村 貴也（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 谷田 諭史（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 平田 慶和（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 水島 隆史（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学）, 東山 繁樹（愛媛大大学院・生化学・分子遺伝学）, 城 卓志（名古屋市立大大学院・消化器・代謝内科学） |
| 抄録 | 【目的】TGF-βは癌細胞の増殖を促進する機能が報告されている．近年，TGF-βがEGFRを活性化し，細胞増殖を促進することが報告された．今回、われわれは胃癌細胞を用いて、TGF-βによるEGFRのtransactivationを介した胃癌細胞増殖メカニズムにつき解析した．【方法】1. 胃癌細胞をTGF-βで刺激し，EGFRのリン酸化をWBにて検討した．ADAM阻害剤を前投与し，TGF-βによるEGFRのtransactivationにおけるADAMの役割を検討した．2. 活性化されたADAMはpro HB-EGFの細胞外ドメインを切断し，HB-EGFはEGFRに結合しこれを活性化，一方，切断された細胞内ドメインのC末端(HB-EGF-CTF)は核に移行し，細胞増殖を促進することが知られている．HB-EGF-CTFのTGF-β刺激による核移行，およびADAM阻害剤による抑制効果を蛍光顕微鏡にて解析した．3. Cell count kit-8 asaayによりTGF-β刺激およびADAM阻害剤による細胞増殖を解析した．4. ADAM17をsiRNAによりknockdownし，TGF-β刺激によるEGFRのtransactivation，HB-EGF shedding，細胞増殖を検討した．5. ROS scavengerであるN-acetyl cystein投与下でのTGF-β刺激によるEGFRのtransactivationにつき解析した．【結果】1.TGF-βはEGFRのリン酸化を誘導し，ADAM阻害剤はEGFRのリン酸化を抑制した．2. TGF-βはHB-EGF-CTFの核内移行を促進し，ADAM阻害剤はこれを抑制した．3. TGF-βは細胞増殖を促進し，ADAM阻害剤は有意にこれを抑制した．4. ADAM17のknockdownによりTGF-βによるEGFRのtransactivation，HB-EGFのsheddingによるHB-EGF-CTFの核移行および細胞増殖は有意に抑制された． 5. N-acetyl cystein投与により，TGF-βによるEGFR transactivationが抑制された．【結論】TGF-βはROS及び主としてADAM17の活性化を介してEGFRのtransactivationを誘導する．このメカニズムはTGF-βによる胃癌細胞の増殖促進作用における１つの重要なpathwayと考えられた． |
| 索引用語 | TGF-β, ADAM17 |