| セッション情報 | 口演大腸癌 診断 |
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| タイトル | O-030：患者末梢血を用いたKRAS変異診断 |
| 演者 | 山田 岳史（日本医科大学消化器外科） |
| 共同演者 | 内田 英二（日本医科大学消化器外科）, 松本 智司（日本医科大学千葉北総病院外科）, 菅 隼人（日本医科大学消化器外科）, 小泉 岐博（日本医科大学消化器外科）, 進士 誠一（日本医科大学消化器外科）, 松田 明久（日本医科大学千葉北総病院外科）, 谷 亞彌（日本医科大学消化器外科）, 原 啓介（日本医科大学消化器外科）, 佐々木 順平（日本医科大学千葉北総病院外科）, 中山 雅人（凸版印刷総合印刷所）, 牛田 弘（凸版印刷総合印刷所）, 北野 史郎（凸版印刷総合印刷所） |
| 抄録 | 【背景】切除不能大腸癌に対する抗EGFR抗体の果たす役割は大きく，KRAS変異診断は重要である．現在ERAS変異診断は外科的に切除された原発巣からサンプルをとるが，ここにいくつかの問題がある．（1）外科手術を行わない症例では生検標本を用いて解析を行うが，その信頼性は？（2）転移巣のKRAS statesは原発巣と一致しているのか？（3）KRAS野生型症例に対し，抗EGFR抗体を用いて治療を行っている最中にKRAS変異をきたしたクローンは増加しないのか？患者末梢血を用いてKRAS statesを診断することが可能となれば，手術標本を必要とせず，原発巣と転移巣の一致率を気にする必要もなく，治療中の変異クローンの増加に対しても対応可能である．【目的】患者末梢血を用いたKRAS変異解析法を確立する．【方法】すでに原発巣が切除され，KRASの解析がおこなわれている症例を対象とした（KRAS変異型で再発が確認されている6例，KRAS野生型でかつ再発のない2例，KRAS野生型で再発が確認されている2例）．患者末梢血を5ml採血し血清を採取，QIAamp circulating nucleic acid kit（キアゲン社）を用いて，循環DNAを精製し，ピコグリーンにて定量を行った後，インベーダープラス法にてKRAS遺伝子変異解析を行った．検出対象とする変異は，コドン12，13に存在する変異7種類（G12A，G12S，G12V，G12C，G12D，G12R，G13D）とした．【結果】再発のあるKRAS変異6例中5例でKRAS変異を同定することができた．同定できなかった1例は径1cmの肺転移のみを有する症例であった．野生型かつ再発を認めない症例では変異KRASを認めなかったが，野生型で抗EGFR抗体治療中の2例のうちの1例でG12Dを認めた．現在原発巣がKRAS野生型で抗EGFR抗体治療を継続中の症例における血清検査を継続している． |
| 索引用語 |