| セッション情報 |
パネルディスカッション4(肝臓学会・消化器病学会合同)
自己免疫性肝疾患の基礎・臨床の最前線
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| タイトル |
肝PD4-10：原発性胆汁性肝硬変における末梢血CD4+T細胞のmicroRNA発現動態の解析
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| 演者 |
中川 良（東京慈恵会医大・消化器・肝臓内科DELIMITER東京大医科学研究所・先端ゲノム医学） |
| 共同演者 |
加藤 直也（東京大医科学研究所・先端ゲノム医学）, 銭谷 幹男（東京慈恵会医大・消化器・肝臓内科） |
| 抄録 |
【目的】原発性胆汁性肝硬変（PBC）の発症機序は明らかでない．近年，種々の自己免疫性疾患におけるmicroRNA（miRNA）動態が注目され，PBCでも末梢血単核球を用いた解析が報告された．今回，我々はPBCの病態形成で中心的な役割を占めるCD4+T細胞におけるmiRNA動態解析を行った．【方法】PBC群(n=7)，健常群(n=7)の末梢血CD4+T細胞より得られたtotal RNAを用いmicroarrayによりmiRNA発現動態を網羅的に解析し，さらにPBC群で特異的発現を認めたmiRNAの発現を定量的real-timePCR(qRT-PCR)により再評価した．qRT-PCRでも有意差を認めたmiRNAの標的遺伝子を予測し，自己免疫反応に関連する遺伝子を抽出した．それら標的遺伝子の発現をqRT-PCRで評価し，miRNA発現と相関のある標的遺伝子とmiRNAの結合をLuciferase 3’UTR reporter assayを用いて確認した．【成績】健常群に比しPBC群では2種のmiRNAが高発現し，13種のmiRNAが低発現していた（p＜0.05，fold change＞1.2）．qRT-PCRによりPBC群におけるmiR-181a-5p，miR-361-5p，miR-374b，miR-425の有意な発現低下が確認された（p＜0.05）．これらmiRNAの標的遺伝子から7つの遺伝子を抽出しqRT-PCRにより解析したところ，NRAS，TNFAIP3，TNFSF9，IL-10，IL-11，BIRC3，DUSP5がPBC群で有意に増加していた（p＜0.05）．さらにLuciferase assay解析によりmiR-425とNRASの結合が確認できた．【結語】PBCのCD4+T細胞における特異的miRNA発現を明らかにした．PBCでの発現低下を認めたmiR-425の標的遺伝子で，CD4+T細胞での発現増加が示され，miR-425との結合が確認されたNRASはT細胞のFOXP3発現に関わると報告されており，PBCの免疫病態形成に関わる可能性が示された． |
| 索引用語 |
PBC, miRNA |
