| セッション情報 |
ワークショップ16(消化器外科学会・消化器病学会・肝臓学会合同)
消化器癌に対する幹細胞研究の現状と展望
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| タイトル |
消W16-4：Gli1による胃型粘液形質マーカー遺伝子MUC5ACの発現制御の解明
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| 演者 |
山道 信毅（東京大・消化器内科） |
| 共同演者 |
中山 千恵美（東京大・消化器内科）, 小池 和彦（東京大・消化器内科） |
| 抄録 |
【目的】Hedgehogシグナル伝達経路は発生に必須の機能を持つ情報伝達系であり，諸臓器の器官形成に不可欠であるとともに，体性幹細胞の制御や成熟組織の維持・再生にも働いている．腸上皮化生を母地として主に生じる胃癌は，消化管分化の制御異常が発癌に強く関連するとされ，Hedgehogシグナルの異常の関与が示唆されているが，十分に解明されていない．そこで，このシグナル経路のエフェクター分子Gliを胃癌細胞株に発現させ，消化管分化という視点から解析を行なった．【方法・結果】Gli1・Gli2を強制発現後に様々な消化管マーカー発現の変化を解析したところ，胃型粘液形質マーカーMUC5ACの発現誘導が認められた．逆にGli1・Gli2をknockdownするとMUC5ACの発現低下を認められ，また，遺伝子上流の諸欠失変異を用いたLuciferase asssayを行うと，翻訳開始点上流125～110bpがMUC5AC発現に必須であった．多くの動物で高度に保存された15bpの領域にはGli結合配列GBSが含まれ，クロマチン免疫沈降実験によってGliがこの領域に動員されることが示された．各組織由来ヒト正常RNAを用いた発現比較では，Gli1・Gli2は全組織に様々に発現しており，明らかな組織特異性を示すMUC5ACとの発現相関は認めず，GliがMUC5AC発現の十分因子ではないことが分かった．Luciferase asssayで更に上流を調べると，2000～4000bp上流により強い転写活性が認め，同領域にはCpGアイランドが存在していた．DNAメチル化阻害剤・ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬によって発現欠失株のMUC5AC発現が回復することから，epigeneticな制御も関連することが明らかとなった．【結論】MUC5AC遺伝子発現には，翻訳開始点上流125～100bpへのGli結合による転写開始が必須である．これに加えて，上流2000～4000bpに発現を制御する領域があり，メチル化やヒストン修飾などのepigeneticな発現調節が，MUC5ACの組織特異的発現の分子基盤を成していることが示唆された． |
| 索引用語 |
Gli1, MUC5AC |
