| セッション情報 |
ポスターセッション(消化器病学会)
肝臓（基礎）
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| タイトル |
消P-4：Wntシグナル転写因子TCF-4によるBcl-xL発現制御
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| 演者 |
古賀 浩徳（久留米大・消化器内科DELIMITER久留米大先端癌治療研究センター・肝癌部門） |
| 共同演者 |
中村 徹（久留米大・消化器内科DELIMITER久留米大先端癌治療研究センター・肝癌部門）, 矢野 博久（久留米大・病理学）, 上野 隆登（朝倉医師会病院）, 鳥村 拓司（久留米大先端癌治療研究センター・肝癌部門）, J.R. Wands（Liver Research Center, Brown University）, 佐田 通夫（久留米大・消化器内科DELIMITER久留米大先端癌治療研究センター・肝癌部門） |
| 抄録 |
【背景と目的】Wntシグナル系はCancer Stem Cell (CSC)の特異な形質を精緻に制御している．最近，我々はその中枢転写因子T-cell factor (TCF)-4のisoformをヒト肝癌細胞株から14種クローニングし(Exp Cell Res 2010)，その構造機能相関を解析している．TCF-4には転写活性を鋭く制御する「SxxSS」モチーフがあり，それを「欠いたTCF-4J isoform」と「有するTCF-4K isoform」のヒト肝細胞癌における発現様式が異なることから，このモチーフが肝発癌過程に深く関与することを明らかにしてきた(PLoS ONE 2012)．本研究では，CSC形質の一つである抗癌剤耐性の発現機構に「SxxSS」モチーフがいかなるインパクトを与えているかについて検討した．【材料と方法】細胞：ヒト肝細胞癌細胞株(HAK-1A, HAK-1B)ほか．蛋白解析：Western blot，FCM．mRNA解析：qPCR．機能解析：アポトーシス，site-directed mutagenesis，Lucアッセイ，ChIPアッセイ．【結果】HAK-1AベースのTCF-4JおよびK過剰発現細胞(J細胞，K細胞)を樹立した．対照を含めた３種の細胞において，K細胞が最もドキソルビシン(DXR)に耐性を示した．細胞周期に差異はなかった．そのK細胞ではMDR-1の発現亢進は見られなかったものの，Bcl-xLの発現増強が認められた．その機序としてTCF-4がbcl-xLのプロモーター領域に結合していること，さらにその結合がSxxSS先頭のSをAに置換したTCF-4K-mutantでは減弱することがChIPによって明らかになった．実際，K-mutant細胞ではBcl-xLの発現が低下しDXR処理によるアポトーシスが増加した．LucアッセイでもTCF-4Kは最も高いbcl-xLプロモーター活性化能を示した．【結論】TCF-4 isoformは，SxxSSモチーフ依存性にBcl-xLの発現調節をしていた．このことから，CSCが示す抗癌剤耐性の機序解明とその克服にはWntシグナル系からのアプローチも重要であると考えられた． |
| 索引用語 |
Wnt, 癌幹細胞 |
