| セッション情報 |
ワークショップ9(消化器病学会・消化器内視鏡学会・消化器外科学会合同)
分子診断学からみた大腸腫瘍の治療成績と予後
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| タイトル |
消W9-2指：大腸腫瘍におけるニューロテンシン受容体１型遺伝子のメチル化と臨床的意義
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| 演者 |
鈴木 拓（札幌医大・分子生物学） |
| 共同演者 |
山本 英一郎（札幌医大・１内科）, 篠村 恭久（札幌医大・１内科） |
| 抄録 |
【目的】大腸腫瘍の診断マーカーとしてDNAメチル化の応用可能性が模索されている。今回我々は、腫瘍径は小さいが垂直方向に進展し浸潤する小型浸潤癌 (small invasive tumor; small IT)と、腫瘍径は大きいが側方進展し粘膜内に留まる非浸潤癌 (large non-invasive tumor; large NT)のメチロームを比較することで、大腸癌の進展様式に関わるメチル化異常を同定することを目的とした。【方法】MCAマイクロアレイ(MCAM)、パイロシークエンス法により臨床検体(浸潤癌90例, 非浸潤腫瘍124例) のメチル化を解析した。アレイCGHによりゲノムコピー数異常を解析した。TaqMan RT-PCRにより遺伝子発現発現を検討した。NTSR1を大腸癌細胞に導入またはノックダウンし、MTTアッセイ、マトリゲル浸潤アッセイ及び遺伝子発現マイクロアレイを行った。【成績】MCAMの結果、large NTでメチル化異常を示す遺伝子群を認めた。この遺伝子群に癌遺伝子として報告されているニューロテンシン受容体１型(NTSR1)が含まれていることに着目した。臨床検体でのNTSR1メチル化をパイロシークエンス法で検証した結果、large NTおよび肉眼形態分類での側方発育型腫瘍(LST)で有意にNTSR1の高メチル化が認められた。一方でsmall ITでのNTSR1メチル化は低レベルで、かつNTSR1遺伝子コピー数の増幅が高頻度に見られた。大腸癌細胞株においてNTSR1遺伝子のメチル化とmRNA発現の間に逆相関がみられた。NTSR1の過剰発現は癌細胞増殖および浸潤能を促進した。一方、NTSR1のノックダウンは癌細胞増殖および浸潤能を抑制した。【結論】NTSR1のメチル化による発現低下は非浸潤性の側方発育と相関する一方、NTSR1の高発現は浸潤性の大腸癌進展に関与すると推測された。今回の結果から、NTSR1メチル化は大腸癌進展の予測マーカーとなりうるとともに、NTSR1が大腸癌の治療標的となりうることが示唆された。 |
| 索引用語 |
大腸癌, メチル化 |
