| セッション情報 |
Research Forum3
肝炎の病態と内科治療
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| タイトル |
RF3-3：DAA時代における難治性症例の対策：IFN併用とIFNフリーとの選択法
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| 演者 |
内田 義人（埼玉医科大学消化器内科・肝臓内科） |
| 共同演者 |
神山 淳一（埼玉医科大学消化器内科・肝臓内科）, 持田 智（埼玉医科大学消化器内科・肝臓内科） |
| 抄録 |
【目的】C型慢性肝炎の治療はシメプレビルの導入で安全性が向上する．また，NS5A阻害薬も利用可能となり，経口2剤も選択肢に加わることが期待される．しかし，その際にNA5Aの耐性変異が問題となり，genotype 1b株では約20%にY93Hの変異が認められる．変異を有する症例では経口2剤でのSVR率が低く，IFN併用療法も考慮すべきである．Y93Hは1塩基変異で生じ，近傍の7塩基には耐性に無関係の変異が2ヶ所で見られ，うち1ヶ所は全ての塩基を呈し得る．このためY93Hの検出には塩基配列の直接解析が必須であった．そこで，サイクリングプローブ法を用いて，臨床検査に利用できる簡易迅速判定法を確立した．【方法】1b型のHCV感染9例の保存血清で，HCV-RNAの塩基配列をダイレクトシークエンスで決定した．一方，NS5A Y93を含む配列を標的としてプライマーを設計し，4種類のサイクリングプローブを用いてリアルタイムPCRを実施した．陽性標準として作成した野生株と変異株の人工合成遺伝子8 Log copies/mLを10倍段階で希釈し，検出感度を評価した．【成績】シークエンス法でY93H変異が認められた検体と，野生型と変異型の混合検体は，何れもサイクリングプローブ法で野生型と変異型がともに検出できた．また，野生型のみの7検体は，サイクリングプローブ法でも全てが野生型として検出された．野生株，変異株とも2～8 Logの範囲で定量可能で，混合検体でも野生株，変異株のHCV-RNA量を区別して定量可能であった．【考案と結語】サイクリングプローブ法によって簡便迅速にNS5AのY93H変異を高感度に定量評価できた．データベースによると1b型HCV株の85%は今回利用した4種のプローブで解析可能である．しかし，15%ではY93近傍に稀な変異が存在し，その際は別4種プローブを用いた第2段階，更に別8種プローブによる第3段階の解析で，全例での定量が可能となる．本検査法はIFNフリーの治療法における難治例の検出に有用と考えられた． |
| 索引用語 |
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